荧光染料,由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其广泛应用于荧光免疫,荧光探针,细胞染色等。包括特异性的DNA染色,用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究。另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂,可作为背景对照,标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然。
常见的荧光染料有异硫氰酸荧光素(FITC)、罗丹明,可用的非磺化的花菁染料包括Cy3,Cy3.5,Cy5,Cy5.5,Cy7,和Cy7.5。
1.异硫氰酸荧光素(FITC)分为异硫氰酸荧光橙红,异硫氰酸荧光黄,异硫氰酸荧光红,异硫氰酸荧光素异构体I,5-异硫氰酸荧光素。其形态为黄色粉末,有吸湿性,是一种生化试剂,也是医学诊断药物,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。并且它能与各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光,加酸后析出沉淀,荧光消失,微溶于丙酮、乙醚和石油醚。FITC分子量为389.4,最大吸收光波长为490~495nm,最大发射光波长为520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。
2.罗丹明B(Rhodamine B),又称若丹明B、玫瑰红B、玫瑰精B、碱性玫瑰精,分子式为C28H31ClN2O3,是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。易溶于水、乙醇,微溶于丙酮、氯仿、盐酸和氢氧化钠溶液。呈红色至紫罗兰色粉末,水溶液为蓝红色,稀释后有强烈荧光,醇溶液有红色荧光。常用作实验室中细胞荧光染色剂。绿色结晶或红紫色粉末,易溶于水、乙醇,微溶于丙酮、氯仿、盐酸和氢氧化钠溶液;水溶液为蓝红色,稀释后有强烈荧光,其水溶液加入氢氧化钠呈玫瑰红色,加热后产生絮状沉淀。于浓硫酸中呈黄光棕色,带有较强的绿色荧光,稀释后呈猩红色,随后变为蓝光红色至橙色。醇溶液为红色荧光,最大吸收波长554nm,最大荧光波长610nm
3.花菁类染料(Cyanine dyes)通常有非常高的超过100000 Lmol-1cm-1消光系数。不同的取代基具有控制发色团的性能,如吸收波长、耐光性、荧光。例如,通过聚次甲基桥键长度的选择来控制吸光度和荧光波长:聚次甲基桥键越长其吸光度越高且发射波长可达到近红外区。已经有许多的花菁染料(Cyanine dyes)用于生命科学领域,一系列的噻唑和恶唑染料用作DNA 和蛋白质染色(如TOTO,YOYO, Stains All和其它)。大部分非磺化的花菁染料衍生物(酰肼盐酸盐类和胺类除外)具有低水溶性,当这些分子用于生物分子标记时, 使用有机溶剂作为助溶剂(5-20%的DMF或DMSO)是有效的反应所必需的。花菁染料应先溶解在有机溶剂中,之后在适当的水溶缓冲剂作用下加入到生物分子溶液中(蛋白质,肽,氨基标记的 DNA)
荧光染料标记的试剂推荐:
Cholesterol-PEG-FITC、胆固醇-聚乙二醇-荧光素
DSPE-PEG-FITC,二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-荧光素
硬脂酸-聚乙二醇-荧光素,SA-PEG-FITC
DSPE-PEG-RB、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-罗丹明
SA-PEG-RB,硬脂酸-聚乙二醇-罗丹明
胆固醇-聚乙二醇-罗丹明,CLS-PEG-RB
二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-CY5;DSPE-PEG-Cy5
DSPE-PEG-Cy5.5
BSA-CY5
BSA-CY5.5
***生物给大家推荐的荧光系列试剂就到这里,更多想知道的疑问可以私信小编,小编非常乐意为您解答!